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戴经理 先生
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发布时间:2020-09-03 17:36:29
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2 10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809 10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,南京动物实验外包,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(Plt;0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(Plt;0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(Plt;0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(Plt;0.05)。
实验动物的标记
1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学***涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学***有:3%~5%溶液(***)、0.5%中性品红(红色)、2%(咖啡色)。
标记的原则是:先左后右,从上到下。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。
2. 挂牌法 常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记,只记录它们的外表特征和毛色即可。
3. 笼子编号 标记在笼子上。
以上只介绍了几种的方法,在使用中可灵活掌握。
动物模型设计的注意事项
注意模型要尽可能再现所要求的人类***
模型时必须强调从研究目的出发,熟悉诱发条件、宿主特征、***表现和发病机理,即充分了解所需动物模型的全部信息,分析是否能得到预期的结果。例如诱发动脉粥样硬化时,动物实验外包公司,草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多,而且病变部位并不出现在主动脉弓。病理表现为纤维***和平滑肌为主,可有大量泡沫样细胞形成斑块,这与人类的情况差距较大。因此要求研究者懂得,动物实验外包推荐,各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响,以及动物***在***学、生化学、病理学等方面与人类***之间的差异。要避免选用与人类对应相似性很小的动物***作为模型材料。为了增加所动物***模型与人类***的相似性,应尽量选用各种敏感动物与人类***相应的动物模型,可参考相关文章《各种敏感动物与人类相似的***模型》。
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