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发布时间:2020-07-30 04:08:05
动物实验动物性别的鉴定
1、大、小鼠的
离乳仔鼠主要以与之间的距离长短及与有无被毛为标志。识别要点是:①雄性的与之间的距离较远,雌鼠较近;②雄性的与之间有毛;③雄性的突起较雌鼠大;④雌鼠较雄鼠明显。成熟后,雄性可见,雌性明显而易于区分。
2、豚鼠的
豚鼠的主要是通过形态来判断。雌性外突起比较小,南京实验外包,用拇指按住突起,余指拨开大的皱褶,可见口呈”V”形(注意发情间期的闭锁现象,即一种除了发情和分娩时外,实验外包代做,关闭口的细胞结构);雄性外有覆盖的隆起,用拇指按住其基部,可见向外突出。
3、兔子的
幼兔的主要以开口部与之间的距离及开口部的形状来判别。哺乳期仔兔,雄性开口部与之间的距离较远,为雌性的1.5-2倍,雌性较近。雌性开口扁形,大小与同;雄性圆形,实验外包费用,略小于。1月龄仔兔,雄性生殖孔呈圆形,翻出可见呈圆柱体的突起;雌性生殖孔呈Y形,翻出仅见有裂缝,裂缝及于。3月龄以上成年兔,雄性明显而雌性无;雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。
鸟类在第二性征如肉冠、羽毛、发声出现前,区分性别极为困难,但可以通过孵出时24小时内进行外翻泄殖腔鉴别。雄性中可观察到微小而能的孔突上有输精管开口,但此法不仅要有丰富的经验,而且准确性常难以。





1、***:
识别:***在显微镜下为黑色细沙状,根据gan染***的不同,可有不同的外形。只要发现培养液浑浊变黄,培养瓶顶部有一层细沙一样的东西。就知道大事不好啦。
处理:可在培养液中加相应的抗sheng素处理。可以用四环素,庆大mei素,或者链mei素,前两者的工作浓度是50 μg/mL;链mei素的工作浓度是100 μg/mL。其实,毛毛虫说句实话,一旦发生污染,如果细胞不是特别特别珍贵的话,还是趁早扔了。
2、霉菌
识别:因为培养液是清亮的,所以霉菌污染非常难以早期发现,等发现时往往已经为时过晚了。培养液中慢慢地出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,如同风中柳絮。细胞仍可生长,但时间一长,细胞的状态就变差。
处理:细胞一旦被霉菌污染,很难挽救,建议果断舍弃该污染细胞,将环境消毒。
采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新洁尔灭擦洗一遍。把水盘里加上饱和量的***铜。
3、支原体:
识别:多为多边形,培养液一般会变浑浊。支原体细胞以后,细胞病变不很明显,支原体污染后,可影响的细胞生长参数。故进行实验前,确认细胞为mycopla***a-free,实验结果之数据方有意义。
处理:没有什么好处理的。直接扔了吧。
4、黑蛟虫:
识别:据说是纳米级的***。低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去。培养液也是不浑的,一般不会太影响。但是如果太多了,也会影响细胞生长和实验结果。
处理:因为根本不知道这是什么物种,所以也谈不上什么处理方式。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5、***:
识别:***污染和霉菌污染差不多。一般培养液清亮,所以很难早期发现。镜下有时候象丝状,有时候象珊瑚状。慢慢地会长出很细的黑色丝状物。这个时候,已经晚了,细胞很难救活了。
处理:同霉菌污染一样,没有什么好处理的,直接扔了吧。然后消毒灭菌培养间,CO2孵箱,器皿和培养液。

1.选择合适的转染***
不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染***。每种转染***都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择适合实验设计的转染***。当然,适合的是gao效、低毒、方便、廉价的转染***。
2.保持佳的细胞状态
一般低的细胞代数(lt;50)能保***型不变。适合转染的细胞是经过几次传代后达到指数生长期的细胞,细胞生长旺盛,容易转染。细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变,总染色体重组或***调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。也就是说同一种系的细胞株,在各实验室不同培养条件下,其生物学性状发生不同程度的改变,导致其转染特性也发生变化。因此,如果发现转染效率降低,可以试着转染新鲜培养的细胞以***较佳结果。
3.选择gao效的转染方法
不同转染***有不同的转染方法,但大多大同小异。转染时应跟据具体转染***推荐的方法,但也要注意,因不同实验室培养的细胞性质不同,质粒定量差异,操作手法上的差异等,其转染效果可能不同,应根据实验室的具体条件来确定较佳转染条件。
4.所构建载体的质量。
转染载体的构建(病毒载体,质粒DNA,动物实验外包推荐,RNA,pcr产物,寡核苷酸等)也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞gan染效率较高,但不同病毒载体有其特定的宿主,有的还要求特定的细胞周期,如逆转录病毒需侵染分裂期的宿主细胞,此外还需考虑一些安全问题(如***污染)。除载体构建外,载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响,如前面提到的超螺旋及线性DNA对瞬时和稳定转染的影响。如果***产物对细胞***性作用,转染也很难进行,因此选择组成或可调控,强度合适的启动子也很重要,同时做空载体及其它***的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。
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