动物实验外包服务分子生物学检测,南京英瀚斯生物科技

正确地评估动物***模型

应该懂得没有一种动物模型能完全人类***真实情况，动物毕竟不是***的缩影。模型实验只是一种间接性研究，只可能在一个局部或几个方面与人类***相似。因此，模型实验结论的正确性只是相对的，终必须在***身上得到验证。过程中一旦出现与人类***不同的情况，必须分析其分岐范围和程度，找到相平行的共同点，正确评估哪些是有价值的。

阑尾炎动物模型

方法 成年大鼠，后固定，无菌条件下开腹，将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜，把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内，距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层)，后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1～2针，将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔，两层缝合关腹，无菌纱布包扎伤口，送回笼中饲养观察。或成年家兔，后固定于***台架上，备皮消毒铺巾后，无菌条件下腹正中切口开腹6cm，寻及盲肠提出阑尾，于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾，随后将阑尾纳回腹腔，逐层关腹。术后，在规定的时间点测定动物体温，行坏死阑尾炎腔内容物***培养，包囊或坏死阑尾大小的检测，以及肉眼病理观察和***形态学改变的镜检。

特点 大鼠术后15d，阑尾呈脓性坏死，外裹一层纤维性包囊，囊内含有大量的***，模型成功率高。兔术后6～12h，阑尾充血、增粗、水肿；12～24h时，阑尾肿胀、增粗更为明显，外被脓苔与周围肠管粘连，部分阑尾壁可见斑点状出血灶，腹腔内有脓性渗液出现。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血，甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液***培养有大肠生长。术后24h，兔体温可升至40℃左右。在整个造模过程中，模型动物神态萎靡，不食不饮，腹部胀满，2～4d内陆续。

睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm， 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上，对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上，周围是水环境,水深3 cm，平台在水面以上1 cm，于平台以上14 cm 处放笼罩，上面放水和食物。水温和室温保持在25 C，每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立，在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 时，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

旷场实验( open field test， OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱，底面平均分为25个小方格，正上方2 m处架一摄像机，镜头对准箱底，实验在安静环境下进行，大鼠置于方箱底面中心，同时进行摄像和计时，3 min 后停止摄像,更换动物后，继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备，观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分，后肢站立次数为垂直得分，两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。

大鼠烫l伤动物模型

方法 按30mg/kg体重的剂量经腹腔***3％戊巴l比妥钠麻l醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热自来水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，以纱布接触大鼠皮肤后计时。

(2)模型特点 大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐***素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。光镜观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清。表皮内有水疱形成，***水肿、间质疏松，胶原纤维断裂，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性。血管扩张、充血，皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞尚清楚，部分肿胀、溶解。皮下***中血管扩张、充血。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解。表皮内有水疱形成，***层间质疏松、充血，胶原纤维融合成片，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性，大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被***，结构不清，***深部可见残余毛囊。皮下***血管扩张、充血l、水肿明显，结构未***。上述结果表明，致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫l伤，致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫l伤.